Esordisce in Serie A con la maglia della Lazio in Juventus-Lazio 4-2 dell'11 giugno 1989. Ma solo nel 1992 conquisterà stabilmente la massima divisione con il Foggia, rimanendo in rossonero tre stagioni sotto la guida di Zdenek Zeman, il quale lo riconverte al ruolo di mediano. Seguono cinque annate alla Roma, in cui viene allenato successivamente da Carlo Mazzone, Carlos Bianchi e poi di nuovo da Zeman. Dal 1999 al 2003 gioca con l'Inter, dove diventa perno fondamentale del centrocampo della formazione di Héctor Cúper nelle stagioni 2001-2002 e 2002-2003. Ha esordito in Nazionale il 28 gennaio 1998, nella partita Italia-Slovacchia (3-0). Di Biagio ha fatto parte della Nazionale sotto le gestioni dei ct Cesare Maldini, Dino Zoff, e Giovanni Trapattoni. Ha partecipato al Mondiale 1998, dove ha realizzato un gol nella seconda partita del girone vinta 3-0 contro il Camerun. Dal 2011 viene nominato selezionatore della Nazionale italiana Under 20.
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ROMA-INTER/ Di Biagio: è la “mia” partita, test importante per il terzo posto (esclusiva)
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